糖基化是分泌蛋白翻译后最常见的修饰之一，在细胞间的相互作用、细胞黏附、恶性转化和转移中起重要作用。
    今天为大家分享一篇利用凝集素芯片对CKD患者、LKD患者和正常人的血液和唾液进行分析，研究糖蛋白在慢性和潜伏性克山病(CKD和LKD)发病机制中作用的文献。该研究结果在《Molecules》在线发表。
 研究思路：
1.   LKD、CKD和健康样本收集；
2.   疾病唾液标志物初筛；
3.   疾病血液标志物初筛
4.   标志物验证。

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1.  凝集素芯片分析男性唾液
   选取10例男性LKD、10例男性CKD组和12例男性健康对照的唾液样本进行凝集素芯片实验，结果显示LKD组和健康对照组有10种凝集素具有显著性差异(图1 )。对CKD组和LKD组进行了比较，发现两组之间有16种凝集素荧光强度存在显著差异(图1)。
 

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2. 凝集素芯片分析女性唾液
    选取10例女性LKD组、10例女性CKD组和12例女性健康对照的唾液样本进行凝集素芯片实验，结果显示女性CKD组和健康对照组有10种凝集素具有显著性差异、LKD组和健康对照组有8种凝集素具有显著性差异、比较CKD组和LKD组，发现CKD组中MAL-I 和WGA的荧光强调明显高于LKD组。(图2)
 

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3. 凝集素芯片分析男性血液
    对男性CKD组、LKD组和健康对照组的血清样本进行凝集素芯片反应，结果显示LKD组男性血清与正常对照组之间的凝集素差异较小，而CKD组和正常对照组中共有17种凝集素的荧光强度存在显著变化(图3)、CKD组和LKD组有14种凝集素荧光强度有显著差异(图3，这些研究结果表明有些凝集素可能有助于鉴别男性CKD和LKD。
  

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4. 凝集素芯片分析女性血液
    对女性CKD组、LKD组和健康组的血清进行凝集素芯片分析，结果显示女性CKD血清与正常对照组相比有14种凝集素具有显著性差异(图4)、
女性LKD组血清与正常对照组相比与正常对照组相比有7种凝集素具有显著性差异(图4)、女性CKD组和LKD组血清相比有15种凝集素具有显著性差异(图4)。

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5.  唾液标志物验证
    基于前期唾液样本凝集素芯片筛选及数据分析结果，选择了6种凝集素作为唾液标志物进行验证（男性唾液标志物3种，PSA、STL、WGA；女性唾液标志物3种，RCA、PHA-E+L、MAL-1）。男性唾液样本芯片结果显示，与健康组相比，CKD组的PSA和WGA信号较弱，而STL的信号较强； LKD组的 PSA信号较弱，WGA和STL的信号较强 ，这表明STL可作为男性CKD和LKD的诊断生物标志物，而WGA可作为区分这两个阶段的标志物。
    女性唾液样本芯片结果显示，与正常对照组相比，CKD和LKD患者唾液中的RCA信号较强，而PHA-E信号较弱，但在CKD组与LKD组间差异不显著。

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 小结：
    本研究利用凝集素芯片作为研究平台，从唾液和血液以及性别等方面对克山病的诊断标志物进行研究，寻找糖蛋白糖基化模式的变化，发现STL可作为是男性CKD和LKD的诊断生物标志物，WGA可能有助于区分这两个阶段，而STL也可作为女性LKD的诊断标志物。
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参考文献：
Sen W , et al,. Roles of Glycoproteins in the Diagnosis and Differential Diagnosis of Chronic and Latent Keshan Disease[J]. Molecules, 2017, 22(5):746.